服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問(wèn)上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
全國(guó)統(tǒng)一服務(wù)熱線：
15201736385
產(chǎn)品中心您當(dāng)前的位置：首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 兔原代細(xì)胞 > 兔外周血單核細(xì)胞
基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔外周血單核細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔外周血單核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 TALL-1人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞 SLU7蛋白抗體 M14 (人黑色素瘤細(xì)胞) 跨膜蛋白93抗體 正常胎兒肺纖維細(xì)胞 RSPO2蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體171抗體
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：937
更新時(shí)間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔外周血單核細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形、巨噬細(xì)胞樣 | YS-01X8442 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔外周血單核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細(xì)胞體積繼續(xù)增大，直徑可達(dá)50-80μm，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素，參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制，還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，并包圍異物。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形、巨噬細(xì)胞樣
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔外周血單核體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA
兔子前列腺素E2(PGE2)ELISAKit ELISA
兔子前列腺素E1(PGE1)ELISAKit ELISA
兔子皮質(zhì)/上腺(CO)ELISAKit ELISA
同源盒蛋白GSC抗體
COX4NB蛋白抗體
TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原
CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein
GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokin僀?僀
Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原
GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
SIRPA Protein Rat 重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白
CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 人同型半胱(Hcy)試劑盒
Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit 人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HumanBullousPemphigoid,BP試劑盒人大皰性類天皰瘡抗體(BP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor，sTNFαRELISAKit人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔外周血單核細(xì)胞大鼠纖調(diào)蛋白(FMOD)試劑盒 ，英文名： FMOD ELISA Kit
Mouse chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 小鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒
Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHTLV-I(Huma-lymphoopicvirusI)ELISAKit人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒
細(xì)胞HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitBTA大鼠膀胱腫瘤抗原
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
